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本生闡述——胎牛血清中的脂肪酸如何去除?
胎牛血清是常見的實驗室培養(yǎng)基營養(yǎng)液,在大部分實驗中是不需要對胎牛血清中的脂肪酸進行去除的,但是,在進行某些特殊細胞培養(yǎng)的時候為了保證實驗的準確性,我們要對胎牛血清中的某些成分進行去除。
常見的脂肪酸去除,我們一般用以下方法:
1、溶解:取適量的牛血潔白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。用濃度為0.2N的HCl,調(diào)治PH至3~3.5。
2、分析:充實溶解后的溶液牛血潔白蛋白移至冰水殽雜物中舉行冰水浴,同時連續(xù)攪拌,維持30min。
3、吸附:參加5%的活性炭,混勻,將混懸液移至冰水殽雜物中舉行冰水浴,同時連續(xù)攪拌,維持1小時。過濾,濾渣采取后再利用。
4、濃縮:濾液用0.2N的NaOH調(diào)治PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器舉行超濾濃縮。
5、凍干:將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液敏捷冷凍至-40℃,連續(xù)1小時左右,升到-25℃,連續(xù)10~20小時,再遲鈍升溫至0℃,維持1~4小時,升溫至生存溫度20℃,分裝為成品。
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